"F-36P Cells|骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCC-2218細胞系相關產品:WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關產品:MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
HLEC細胞系相關產品:50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
細胞生長:貼壁
細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內,依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
F-36P Cells|骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
639-V細胞系相關產品:PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
SKRC-52細胞系相關產品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
HS-5細胞系相關產品:HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
HuH1細胞系相關產品:NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
細胞傳代方法:每周2次換液
以下對初次培養(yǎng)細胞人員來說,是非常好的開門教程:準備室的設備:單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺;配液室的設備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液);培養(yǎng)室的設備:液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄);必須放在無菌間的設備:離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌:定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外燈照射;實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘;實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺;實驗人員的無菌準備:肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦凈雙手。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
F-36P Cells|骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
GA-10 clone 4細胞系相關產品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
QBC-939細胞系相關產品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關產品:SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
NS-I/1細胞系相關產品:3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
H-719細胞系相關產品:Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
MES13細胞系相關產品:FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
S3-HeLa細胞系相關產品:Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關產品:Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
AZ521細胞系相關產品:3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
CORL23細胞系相關產品:DoTc2細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞、RF/6A細胞
DMS79細胞系相關產品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
FHs 74 Int細胞系相關產品:KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
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LS 513細胞系相關產品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
Hs 683.T細胞系相關產品:TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
NCIH226細胞系相關產品:H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
MM-1S細胞系相關產品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
MDA-MB435細胞系相關產品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
HN-6細胞系相關產品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
WEHI164細胞系相關產品:RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
MDA.MB.435細胞系相關產品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
PK-136細胞系相關產品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
Hs 606細胞系相關產品:L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞系相關產品:NCIH1755細胞、NCI H69細胞、WEHI-3B細胞
87MG細胞系相關產品:BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
OVCA-432細胞系相關產品:MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞
OCI Ly1細胞系相關產品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
RPMI1846細胞系相關產品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
MDA-MB-415細胞系相關產品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
SU-DH-L5細胞系相關產品:PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
P-388D1細胞系相關產品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
EFO27細胞系相關產品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
A375.S2細胞系相關產品:DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞
H-2196細胞系相關產品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
HCC0015細胞系相關產品:COV434細胞、IBMF-7細胞、IMCD-3細胞
Hs 766T細胞系相關產品:HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
BT-20細胞系相關產品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關產品:A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
PLA-801D細胞系相關產品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
DMS-153細胞系相關產品:H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
NCIH1734細胞系相關產品:SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
RT-BM細胞系相關產品:DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
RK13細胞系相關產品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
786-O RCC細胞系相關產品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
NOZC-1細胞系相關產品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
DKMG細胞系相關產品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
SKMES細胞系相關產品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
HHFK細胞系相關產品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
FK81細胞系相關產品:TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞
HBZY-1細胞系相關產品:OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞
Hs 852.T細胞系相關產品:IR 983F細胞、HS852.T細胞、NTC-200細胞
JF305細胞系相關產品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
GLRK 13細胞系相關產品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
UO31細胞系相關產品:MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
ZR-75-1細胞系相關產品:H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關產品:Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
NK-10A細胞系相關產品:X63細胞、EFO 27細胞、LL/2(LLc1)細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
NCIH2085細胞系相關產品:Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
HTR-8細胞系相關產品:NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
SKNEP-1細胞系相關產品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關產品:C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
F-36P Cells|骨髓增生異常綜合征細胞系
GM02219D細胞系相關產品:RMa-bm細胞、NCIH716細胞、RPMI7666細胞
WC00079細胞系相關產品:A549ATCC細胞、VMM5A細胞、SNU-119細胞
S3-HeLa細胞系相關產品:Hi-five細胞、CCD 966 SK細胞、HVSMC細胞
S3 HeLa細胞系相關產品:National Medical Center-Glioma 1細胞、MSTO-211細胞、Farage細胞
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