"F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類(lèi)型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞 WM115mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞 D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái),很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來(lái)也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò),細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:每周2次換液 PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞 MDA-MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞 Hs852細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞 CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞 RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞 OCI-Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞 LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細(xì)胞、Scott細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞 Hs 729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞、SW1463細(xì)胞 HEK293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細(xì)胞、251MG細(xì)胞、B16F10細(xì)胞 NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞 RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞 NCI-H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細(xì)胞、COLO394細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞 CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞 RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系 H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞 H-1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞 MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞 Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞 PT-67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞 EMT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT-2細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞 P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞 KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞 HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞 SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞 OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞 C17.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞 HFL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞、H196細(xì)胞 RMG-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞、293T/17細(xì)胞 GS9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞、RGE細(xì)胞 CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞 JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞 NCI-H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞 CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞 NCI-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞 TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞 OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞 LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞 HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞 HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞 I90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 13細(xì)胞、SW1463細(xì)胞、INS-1細(xì)胞 HEYA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞、FET細(xì)胞 HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞 LICR-LON-HN6-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞 COLO684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP5d細(xì)胞、MDA134細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞 Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞 H-676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細(xì)胞、MN-9D細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞 LOU-NH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞 NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞 SK-Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細(xì)胞、YAC細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞 Calu-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細(xì)胞、SW-13細(xì)胞、GM06141細(xì)胞 MDCC-MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞 KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞 OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞 RBL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細(xì)胞、B16細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞 H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細(xì)胞、HOK細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞 COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞 NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞 H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞 SUM102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞 NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞 Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞 CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞 R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系 LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞 Malme3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞、C17.2細(xì)胞 A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細(xì)胞、G361細(xì)胞、Z310細(xì)胞 LC-1/sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞 "
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