"HCC1806 Cells|人乳腺鱗狀癌細胞系
細胞背景資料:該細胞源自一位患有乳腺髓樣癌的44歲黑人女性,表達WNT7B癌基因,細胞與細胞邊界處有細胞橋粒、微絨毛、張力細絲。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞
DITNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
細胞生長:貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
HCC1806 Cells|人乳腺鱗狀癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
L Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
P31 FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
【凍存細胞操作】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC1806 Cells|人乳腺鱗狀癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
Farage OL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
CMT93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞
HCC1806 Cells|人乳腺鱗狀癌細胞系
143 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
P560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞
P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
CD-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
VCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
AAV-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P19細胞、A1847細胞、HECV細胞
NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
HIEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JeKo-1細胞、Ramos-RA1細胞、LNCaP FGC細胞
SCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
HCC-1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
KM.12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
SU.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞
BxPC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7666細胞、M 1細胞、H-345細胞
HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
RPMI8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細胞、MDCC MSB1細胞、Rat 1細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞
P388.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
SLMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
C4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細胞、SL-1細胞、MUM2B細胞
HCC1806 Cells|人乳腺鱗狀癌細胞系
NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、U-138 MG細胞、MKN-1細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、RPTEC/TERT1細胞、HUVSMC細胞
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細胞、TCC-PAN2細胞、MBVP細胞
SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細胞、LAD-2細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞
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