"HCC1806 epithelioid cells人乳腺鱗狀癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞源自一位患有乳腺髓樣癌的44歲黑人女性,表達(dá)WNT7B癌基因,細(xì)胞與細(xì)胞邊界處有細(xì)胞橋粒、微絨毛、張力細(xì)絲。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! PTK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞 NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞 Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 HCC1806 epithelioid cells人乳腺鱗狀癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞 AsPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞、LSECs細(xì)胞 95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞 JeKo-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞 Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HCC1806 epithelioid cells人乳腺鱗狀癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞 SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞 MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞 SKLMS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC-21H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞 Normal Rat Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526 mel細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞 HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞 Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞 PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞 Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞 HCC1806 epithelioid cells人乳腺鱗狀癌細(xì)胞系 LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞 CAL62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞 H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞 SW527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R3/1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞 Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞 MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞 MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞 NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞 LS 1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、LY細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞 UWB1.289+BRCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞 HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞 EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細(xì)胞、H929細(xì)胞、SW480E細(xì)胞 SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞 MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K2細(xì)胞、BT325細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞 ASH-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1703細(xì)胞、SW756細(xì)胞、NCI-H2342細(xì)胞 Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞 HCC-1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞 K422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞 TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細(xì)胞、H-2052細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞 CHL/IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞 NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞 SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞 Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞 BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞 H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞 LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞 COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞 MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞 DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞 F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞 KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞 BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞 CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞 U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞 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