"MDA-MB-134-VI Cells|人乳腺導管癌細胞系
細胞背景資料:該細胞1973年由R. Cailleau建系,源自74歲乳腺導管癌女性患者的胸腔積液,細胞生長緩慢,松散貼壁,生長過程中會脫落到培養(yǎng)基,不會匯合,過表達FGF受體
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SNK-1細胞系相關產品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
KYSE 410細胞系相關產品:ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
C33A細胞系相關產品:NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
細胞生長:貼壁
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
MDA-MB-134-VI Cells|人乳腺導管癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
CAKI1細胞系相關產品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
U138-MG細胞系相關產品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
A-1847細胞系相關產品:SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關產品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現這里更徹底,超凈臺內根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
MDA-MB-134-VI Cells|人乳腺導管癌細胞系
細胞生長特性:松散貼壁生長
DC2.4細胞系相關產品:Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
AM-38細胞系相關產品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
NCIH1618細胞系相關產品:CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
HPAF2細胞系相關產品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
He-La細胞系相關產品:NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
SKO-007細胞系相關產品:HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
NCIH1781細胞系相關產品:Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
HCC1187細胞系相關產品:ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
SW 837細胞系相關產品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
MiaPaCa-2細胞系相關產品:TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
H-1694細胞系相關產品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
UO.31細胞系相關產品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
MDA-MB-134-VI Cells|人乳腺導管癌細胞系
RERF-LC-MS細胞系相關產品:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
NCI-H226細胞系相關產品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
TE8細胞系相關產品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
CCC-HSF-1細胞系相關產品:McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
SK_HEP1細胞系相關產品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
H-322細胞系相關產品:LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞
OV-90細胞系相關產品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
EFM192C細胞系相關產品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
EFM192C細胞系相關產品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
COLO 678細胞系相關產品:OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
PK-13細胞系相關產品:PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
HGC-27細胞系相關產品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
RT-112細胞系相關產品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
SY5Y細胞系相關產品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
32D CL3細胞系相關產品:NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
MB231細胞系相關產品:MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
D407細胞系相關產品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
COLO-824細胞系相關產品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
U-251MG細胞系相關產品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
Hs606T細胞系相關產品:FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
NCI-H1836細胞系相關產品:GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
T-ALL 1細胞系相關產品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關產品:MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
CT26.WT細胞系相關產品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
V79細胞系相關產品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
KB細胞系相關產品:T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
NCI-H1672細胞系相關產品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
T1-73細胞系相關產品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
BNCL2細胞系相關產品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
Colo205細胞系相關產品:KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
UC-3細胞系相關產品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
NCIH2135細胞系相關產品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
CCFSTTG1細胞系相關產品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
IGROV細胞系相關產品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
PANC1005細胞系相關產品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
H-676B細胞系相關產品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
OCI-Ly19細胞系相關產品:T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
Jurkat clone A3細胞系相關產品:LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
HCC827細胞系相關產品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
NT2D1細胞系相關產品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
NGP細胞系相關產品:CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關產品:LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
INS1細胞系相關產品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
MHCC97-L細胞系相關產品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
COR-L23細胞系相關產品:CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關產品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
H-1930細胞系相關產品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
PaTu 8988 S細胞系相關產品:Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
COLO 206細胞系相關產品:H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
MV3細胞系相關產品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
MDA-MB-134-VI Cells|人乳腺導管癌細胞系
Sp2/0-Ag14細胞系相關產品:SUDHL5細胞、BEAS 2B細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
293 EBNA細胞系相關產品:Calu 3細胞、OCM1A細胞、DHL-2細胞
NCIH1781細胞系相關產品:Jijoye細胞、beta-TC6細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
NCIH2110細胞系相關產品:Psi-2-DAP細胞、OVCAR 8細胞、MDCK-II細胞
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