"MDA-MB-134-VI Cell:人乳腺導管癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:該細胞1973年由R. Cailleau建系,源自74歲乳腺導管癌女性患者的胸腔積液,細胞生長緩慢,松散貼壁,生長過程中會脫落到培養(yǎng)基,不會匯合,過表達FGF受體
SK-N-DZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-134-VI Cell:人乳腺導管癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2—3次
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
Jurkat FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細胞、KMY1022細胞、SNK6細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
細胞生長特性:松散貼壁生長
MDA-MB-134-VI Cell:人乳腺導管癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
NCI-H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
TMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞
MCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
MDA-MB-134-VI Cell:人乳腺導管癌細胞系
H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
PL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
F-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
SN12C-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
NCI/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞
SUNE 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞
NCCIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
H-1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
MuM-2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
6-T CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞
SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
H-1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
MDA-MB-134-VI Cell:人乳腺導管癌細胞系
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
MRASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
OP9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細胞、P3X63 Ag8細胞、HCC-1187細胞
C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
MGHU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細胞、SK-N-BE2細胞、COLO 320 HSR細胞
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