抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
ATP合成酶β5抗體 別 名 ATP 5B; ATP synthase H+ transporting mitochondrial F1 complex beta polypeptide; ATP Synthase H+ Transporting Mitochondrial F1 Complex Subunit Beta; ATP synthase subunit beta mitochondrial; ATP synthase subunit beta, mitochondrial; ATP5B; ATPB; ATPB_HUMAN; ATPMB; ATPSB; MGC5231; Mitochondrial ATP synthase beta subunit; Mitochondrial ATP Synthase Subunit Beta; Mitochondrial ATP synthetase beta subunit.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ATP5B
中文名稱 ATP合成酶β5抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 51kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATP5B
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
依拉地平標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Isradipine
達拉濱標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:300mg 英文名稱:Fludarabine Phosphate
二類殘留溶劑基標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:
左沙鹽鹽相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:30mg 英文名稱:
一類殘留溶劑1,1二標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:
伐他汀標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Lovastatin
利多癸酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:Bromperidol Decanoate
鎂加鋁標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Magaldrate
半乳糖二異美汀標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Isometheptene Mucate
1,2二(2基己基氧碳基)磺標(biāo)準(zhǔn)品
規(guī)格:100mg 英文名稱:Docusate Potassium
3三羥基2羥 進口、國產(chǎn) TAPSOsodiumsalt 含量:AR
3基 進口、國產(chǎn) 3Nitroaniline 含量:高純,75%
3基 進口、國產(chǎn) 3Nitrophenol 含量:BR,98%
3基 進口、國產(chǎn) 3′Nitroacetophenone 含量:CP,99%
3氫鹽 進口、國產(chǎn) 3Bromopropylaminehydrobromide 含量:色固
3基脫氧雪腐鐮刀菌 進口、國產(chǎn) 3AcDON 含量:CP
3吲哚 進口、國產(chǎn) IAA 含量:超純,99%
3吲哚基βD喃半乳糖苷 進口、國產(chǎn) IndoxylGal 含量:AR
3吲哚基βD葡糖苷環(huán)己鹽 進口、國產(chǎn) IndoxylGlucuronide 含量:高純,98%
4(2基)磺酰鹽鹽 進口、國產(chǎn) AEBSFhydrochloride 含量:試劑級,98%
上皮細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1抗體3-Benzalphthalide中文名:3-亞芐基苯酞別名:分子式:C15H10O2
內(nèi)皮素2抗體L-Aspartic acid中文名:L-天門冬氨酸別名:分子式:C4H7NO4
內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨酸激酶B3抗體8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid中文名:8-苯胺-1-萘磺酸別名:分子式:C16H13NO3S
軟骨外胚層發(fā)育不良相關(guān)蛋白抗體p-Anisic acid中文名:對茴香酸別名:對甲氧基苯甲酸分子式:C8H8O3
環(huán)磷酸腺苷調(diào)節(jié)鳥嘌呤核苷酸交換因子1抗體3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐別名:分子式:C17H6O7
ATP合成酶β5抗體 Vibrio alginolyticus種屬:Vibrio alginolyticus
分離基物:海水
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:Marine Agar 2216:蛋白棟 5.00 g 酵母粉 1.00 g Fe(III) citrate 0.10 g NaCl 19.45 g 無水MgCl2 5.90 g Na2SO4 3.24 g CaCl2 1.80 g KCl 0.55 g NaHCO3 0.16 g KBr 0.08 g SrCl2 34.00 mg H3BO3 22.00 mg Na-silicate 4.00 mg NaF 2.40 mg (NH4)NO3 1.60 mg Na2HPO4 8.00 mg 蒸餾水 1000.00 ml pH 7.6 ± 0.2。121℃,15min。
生長條件:30℃,好氧24-48h解藻弧菌(溶藻弧菌)