抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ATRNL1
中文名稱 ATRNL1蛋白抗體
別 名 ATRN1_HUMAN; ATRNL1; Attractin-like protein 1; KIAA0534.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細胞膜受體 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號
蛋白分子量 predicted molecular weight: 147kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ATRNL1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是ATRNL1蛋白抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
3氧基酪標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
普羅相關(guān)物質(zhì)B標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
鹽標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Cathinone Hydrochloride CI
曲安奈德標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Triamcinolone Acetonide
克利銨標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Clidinium Bromide
馬來依那普利標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Enalapril Maleate
β環(huán)糊精標準品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Beta Cyclodextrin
利塞膦相關(guān)物質(zhì)C標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
鹽頭孢肟標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Cefmenoxime Hydrochloride
來米特標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Leflunomide
3羥基2肼 進口、國產(chǎn) 3Hydroxy2naphthoichydrazide 含量:CP,98%
3羥基4[(2羥基5基基)偶]1磺 進口、國產(chǎn) Calmagite 含量:IND
3羥基4氧基 進口、國產(chǎn) Isovanillicacid 含量:BR,97%
3羥基L酪 進口、國產(chǎn) LDopa 含量:BR,98%
3羥基α基L酪合物 進口、國產(chǎn) αMethylLDOPA 含量:BR,99%
3羥基 進口、國產(chǎn) 3Hydroxybenzoicacid 含量:CP,99%
3羥基膽基 進口、國產(chǎn) Lithocholicacid 含量:熒光純,95%
3羥基茴香 進口、國產(chǎn) 3Methoxyphenol 含量:CP,99%
3羥基酪鹽鹽 進口、國產(chǎn) Dopaminehydrochloride 含量:特純,98.5%
3巰基1,2二 進口、國產(chǎn) 1Thioglycerol 含量:BR,98%
核輸出蛋白5抗體2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate中文名:二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯別名:分子式:C12H14N2S3
早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1抗體p-Anisoin中文名:對茴香偶姻別名:分子式:C16H16O4
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體7-Anilino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid中文名:7-苯胺基-4-羥基-2-萘磺酸別名:分子式:C16H13NO4S
表皮細胞表面抗原1抗體Benzanilide中文名:苯甲酰苯胺別名:分子式:C13H11NO
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F1抗體Benzoin中文名:安息香別名:分子式:C14H12O2
ATRNL1蛋白抗體 Vibrio harveyi種屬:Vibrio harveyi
分離基物:海水
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:TSA+5%脫纖維羊血
生長條件:30℃,好氧哈氏弧菌