抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DcR1
中文名稱 腫瘤壞死因子配體超家族成員10C
別 名 Decoy receptor 1;TNFRSF10C; CD263; DcR 1; LIT; Lymphocyte inhibitor of TRAIL; TNF Related Apoptosis Inducing Ligand Receptor 3; TNFRSF10C; TRAIL R3; TRAIL receptor 3; TRAIL Receptor Without An Intracellular Domain; TRAILR3; TRID; Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Member 10C; DcR1; TRAIL-R3.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細(xì)胞膜受體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 23kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TNFRSF10C
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是腫瘤壞死因子配體超家族成員10C 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
10羥基喜樹 4Butylbenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2一抗
可可 4Benzyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)泛素酯酶L3一抗
D松 4Decyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)泛素酯酶L1+3一抗
常春藤皂苷元 4(Hexyloxy)benzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)乳頭狀瘤E6相關(guān)蛋白一抗
花椒毒素 4Heptyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)同源蛋白UNCX一抗
白花前胡 4nOctyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)核蛋白95一抗
佛手柑內(nèi);香柑內(nèi)... 4Octadecyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1一抗
左旋肉 4Propoxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1一抗
化矢車菊素; 花青素 4'Butylacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)TH糖蛋白一抗
銨 4'Butoxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)輔酶細(xì)胞色素C還原酶核心蛋白1一抗
酵母聚糖A 4'Hexylacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)泛素結(jié)合酶E2變異體1一抗
2,4二 4'Heptylacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)泛素結(jié)合酶E2蛋白A一抗
鎳 4'nOctylacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)泛素結(jié)合酶E2O一抗
白樺脂 4'Pentylacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)泛素蛋白連接酶J2一抗
鋁 4(transPropylcyclohexyl)benzonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)泛素蛋白連接酶M一抗
化矢車菊素; 花青素 transButylcyclohexanecarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T)泛素蛋白連接酶W一抗
5羥色 1Bromononylbenzene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)泛素結(jié)合酶E2J1一抗
半胱胺酸蛋白酶蛋白-13抗體Ellagic acid中文名:鞣花酸別名:分子式:C14H6O8
細(xì)胞周期相關(guān)激酶抗體Methyl 6-glucosyloxysalicylate中文名:別名:分子式:C14H18O9
周期素依賴性激酶3抗體Henryoside中文名:別名:分子式:C26H32O15
周期素F抗體Lecanoric acid中文名:茶漬酸別名:茶漬衣酸; 紅粉苔酸分子式:C16H14O7
細(xì)胞表面趨化因子受體10抗體Ducheside A中文名:別名:分子式:C20H16O12
腫瘤壞死因子配體超家族成員10C Endomycopsis│fibuliger種屬:Endomycopsis│fibuliger
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級(jí):1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:生產(chǎn)飼料。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0077
生長條件:28℃
存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法扣囊擬內(nèi)孢霉