腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶 別 名 A disintegrin and metalloproteinase domain 17; ADAM 17; ADAM metallopeptidase domain 17; ADAM17 protein; CD 156b; CD156b; CD156b antigen; CSVP; MGC71942; Snake venom like protease; TACE; TNF alpha convertase; TNF alpha converting enzyme; Tumor Necrosis Factor Alpha Converting Enzyme; A disintegrin and metalloproteinase domain 17 (tumor necrosis factor, alpha, converting enzyme).
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ADAM17/CD156b
中文名稱 腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶
研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 68/93kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ADAM17
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
肺炎克雷伯氏菌 Klebsiella pneumoniae
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
巨大芽孢桿菌 BacillusmegateriumdeBary
法國蜜環(huán)菌(假蜜環(huán)菌,榛蘑) Armillariella gallica
土生拉烏爾菌(土生克雷伯菌) Raoultellaterrigena=Klebsiellaterrigena
單核增生李斯特菌
釀酒酵母 SaccharomycescerevisiaeHansen
褐球固氮菌 Azotobacter chroococcum
菌 Penicillium expansum Link
串珠鐮孢 Fusarium moniliforme
500毫升低糖,液體
M9肉湯250克M9 BrothBR
F2營養(yǎng)混合物10升F2 Nutrient Mixture含L-谷酰,不含NaHCO3
500毫升不含谷酰
M199培養(yǎng)基10升M199 Medium細(xì)胞培養(yǎng)用
1640培養(yǎng)基10升RPMI 1640含L-谷酰,不含鈉
M9CA肉湯250克M9CA BrothBR
M63肉湯250克M63 BrothBR
500毫升含谷酰
DMEM/F12培養(yǎng)基10升F2(DMEM)BR
10升無紅,含L-谷酰
500毫升無血清,含雙抗
谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體FD-838中文名:別名:分子式:C22H21NO7
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體N-Benzyloleamide中文名:別名:分子式:C25H41NO
三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體N-Benzyllinoleamide中文名:別名:(9Z,12Z)-N-Benzyloctadeca-9,12-dienamide分子式:C25H39NO
?;o酶A脫氫酶長鏈抗體1-Methoxyberberine中文名:1-甲氧基小檗堿別名:分子式:C21H20NO5
?;o酶A脫氫酶中鏈抗體Stylopine中文名:刺罌粟堿別名:分子式:C19H17NO4
腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶 Torulopsis│apicola種屬:Torulopsis│apicola
分離基物:菊花
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:以甘蔗糖蜜為原料發(fā)酵制甘油。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0375
生長條件:28-30℃
存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法蜜蜂生球擬酵母
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。