抗體反應的因素:
1.電解質 :抗原抗體特異結合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質影響,產品僅用于科研如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應最適溫度。
胎盤和前列腺相關蛋白DLG5抗體 別 名 Discs large homolog 5 (Drosophila); Discs large homolog 5; Discs large protein LP DLG; Discs large protein P dlg; Discs large protein P-dlg; Disks large homolog 5; DLG 5; DLG5; DLG5_HUMAN; KIAA0583; Large type of P DLG; LP DLG; P DLG5; PDLG; Placenta and prostate DLG.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat
產品類型 一抗
英文名稱 Anti-DLG5
中文名稱 胎盤和前列腺相關蛋白DLG5抗體
研究領域 腫瘤 信號轉導 細胞骨架 細胞膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 214kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DLG5
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應率。
產品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結合;
2.可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時,化學比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標記二抗工作液:生物素標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
異維A英文名稱:Different dimension A acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mg單鏈結合蛋白70一抗
鹽維拉帕米英文名稱:Vera Pammy hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:50mgRAS癌基因相關蛋白RAB17一抗
鹽羅通定英文名稱:Luo Tongding hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mgG蛋白結合蛋白RAB38一抗
辛夷(望春花)英文名稱:Xinyi (wangchunhua)保存:20℃,避光規(guī)格:4gG蛋白結合蛋白RAB10一抗
五倍子英文名稱:Galla chinensis保存:20℃,避光規(guī)格:1gG蛋白結合蛋白RAB11a一抗
積雪草英文名稱:Centella asiatica保存:20℃,避光規(guī)格:1.2gG蛋白結合蛋白RAB6A一抗
救必應英文名稱:It should save保存:20℃,避光規(guī)格:4g復制激活因子C1一抗
桑寄生英文名稱:Sang Jisheng保存:20℃,避光規(guī)格:5g復制激活因子C2一抗
萊菔子英文名稱:Semen Raphani保存:20℃,避光規(guī)格:1g膽酯酶抑制劑8一抗
胡黃連英文名稱:Picrorhiza保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g神經元突觸膜胞外分泌調節(jié)蛋白1一抗
枸杞子英文名稱:The fruit of Chinese wolfberry保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g神經元突觸膜胞外分泌調節(jié)蛋白2一抗
狗脊英文名稱:Cibotium barometz保存:20℃,避光規(guī)格:2gRMND5B蛋白一抗
知母英文名稱:Rhizoma Anemarrhenae保存:20℃,避光規(guī)格:3gRNA結合蛋白15一抗
忍冬藤英文名稱:Ren Dongteng保存:20℃,避光規(guī)格:2g鋅指蛋白754一抗
杜仲葉英文名稱:Leaves of Eucommia ulmoides保存:20℃,避光規(guī)格:5g受體結合絲蘇激酶3一抗
蘇木英文名稱:Hematoxylin保存:20℃,避光規(guī)格:1g受體結合絲蘇激酶5一抗
牛膝英文名稱:Achyranthes bidentata保存:20℃,避光規(guī)格:1g垂體瘤細胞凋亡一抗
11號染色體開放閱讀框21抗體prim-O-Glucosylcimifugin中文名:升麻苷別名:升麻素苷分子式:C22H28O11
11號染色體開放閱讀框24抗體Salidroside中文名:紅景天苷別名:分子式:C14H20O7
11號染色體開放閱讀框53抗體Gastrodin中文名:天麻素別名:分子式:C13H18O7
11號染色體開放閱讀框57抗體7',8'-Dihydroobolactone中文名:別名:分子式:C19H20O4
11號染色體開放閱讀框65抗體trans-2,3-Dihydro-3-ethoxyeuparin中文名:別名:分子式:C15H18O4
胎盤和前列腺相關蛋白DLG5抗體 Chitinophagarupis種屬:Chitinophagarupis
分離基物:懸崖土
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長條件:30℃Chitinophagarupis