"KLM-1細胞：人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之；支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義；偵測出細胞株有支原體污染時，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值會越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
hEM15A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
LX-2細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
CNE2細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞
HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
NCIH1963細胞系相關產(chǎn)品：C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
ST細胞系相關產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
HBSMC細胞系相關產(chǎn)品：Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞
NCIH810細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
SW-948細胞系相關產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
H-3255細胞系相關產(chǎn)品：HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞
SW 837細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
NCI-H322T細胞系相關產(chǎn)品：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關產(chǎn)品：RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
KU-812細胞系相關產(chǎn)品：PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
KU-812細胞系相關產(chǎn)品：PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
MFE 296細胞系相關產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
H-4細胞系相關產(chǎn)品：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
tdott細胞系相關產(chǎn)品：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
WILL-2細胞系相關產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞
Hs746-T細胞系相關產(chǎn)品：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
RL-95-2細胞系相關產(chǎn)品：SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產(chǎn)品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
HEC-251細胞系相關產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
MHCC97細胞系相關產(chǎn)品：SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
HuNS1細胞系相關產(chǎn)品：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
KOPN-8細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
HRA-19細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
H-1770細胞系相關產(chǎn)品：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
WM-239細胞系相關產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
EU-2細胞系相關產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
THLE-2細胞系相關產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
GM03190細胞系相關產(chǎn)品：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
JIII細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-468細胞、LS1034細胞、3D4/21細胞
LWnt-3A細胞系相關產(chǎn)品：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
NS-20Y細胞系相關產(chǎn)品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
QSG-7701細胞系相關產(chǎn)品：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
Vero C1008細胞系相關產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
NCI-H747細胞系相關產(chǎn)品：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
Kasumi 1細胞系相關產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞系相關產(chǎn)品：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞
KY70細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
SNB-19細胞系相關產(chǎn)品：LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
SCI1細胞系相關產(chǎn)品：HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
CL40細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
JJN-3細胞系相關產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
CMK細胞系相關產(chǎn)品：LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞
H841細胞系相關產(chǎn)品：B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
NCIH2085細胞系相關產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
OCILY10細胞系相關產(chǎn)品：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
A549ATCC細胞系相關產(chǎn)品：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞
Panc 3.27細胞系相關產(chǎn)品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
16-HBE14o細胞系相關產(chǎn)品：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞
KP-N-NS細胞系相關產(chǎn)品：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞
MCF12A細胞系相關產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
D283-MED細胞系相關產(chǎn)品：MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
CV-1.K細胞系相關產(chǎn)品：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
NGEC細胞系相關產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
NFS 60細胞系相關產(chǎn)品：CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
H292細胞系相關產(chǎn)品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
IOSE-Mar細胞系相關產(chǎn)品：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞
HET1A細胞系相關產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
Hs 675.T細胞系相關產(chǎn)品：PanC1細胞、KYSE-270細胞、NHEK細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
COLO320 DM細胞系相關產(chǎn)品：RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞
LNCaP.FGC細胞系相關產(chǎn)品：NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞
SF 763細胞系相關產(chǎn)品：GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
CCD 1112SK細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
KCL-22細胞系相關產(chǎn)品：Central Adrenergic TH-expressing a細胞、J 774A.1細胞、GM00637I細胞
OAW 42細胞系相關產(chǎn)品：RMG-I細胞、SKNBE(2)細胞、Reh細胞
CNE2細胞系相關產(chǎn)品：WEHI 3細胞、A 72細胞、RPMI-2650細胞
HEK293S細胞系相關產(chǎn)品：RCC4細胞、SK-SH-SY5Y細胞、PANC 813細胞
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