"KLM-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞
HSC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細(xì)胞、AR42J細(xì)胞、H-510A細(xì)胞
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KLM-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
hRPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
SNU739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-PAC1細(xì)胞、149 PT細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞
PaTu-8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
KLM-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
HuT 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞
RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞
H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
SW-626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞
KLM-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
HPAF2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞
KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞
HCC1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞、A-673細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞
Tu-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
HCE-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞
HCE-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-8_13細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞
KYSE 270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP92細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞、G-361細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞
KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
HCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞
IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞
MCCAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGHAVSMC細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞、H1437細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
HCV 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
CNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞、ECV細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
U-87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFHL-2細(xì)胞、A375細(xì)胞、T98 G細(xì)胞
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
SK-MEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞
RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
KLM-1 Cell:人胰腺癌細(xì)胞系
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
HUCCT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞
HSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 H細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞、WI-38細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
MX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞、FRO細(xì)胞
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