"LNCaP C4-2細(xì)胞：人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：前列腺癌；左鎖骨上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見(jiàn)得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
OVCA 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細(xì)胞、RT-112細(xì)胞、NK92MI細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
H-1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞
Karpas 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細(xì)胞、AML-12細(xì)胞、RINm5F細(xì)胞
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
NBL-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細(xì)胞、H-1395細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞
H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro2a細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
Colo205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細(xì)胞、RAG細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
OCM1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
RK-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞
PK136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
Tu-177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUG-Chor1細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞、WM2664細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞
OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞
BT-483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞
149 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
TR-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞
MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8-653細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞
CCC-ESF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞、MB231細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞
BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 4細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞、H-2087細(xì)胞
Hs-695-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞
LP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞、AML12細(xì)胞
Hs 737.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細(xì)胞、BT細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss3T3細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞
PANC-02-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細(xì)胞、NB19細(xì)胞、H69/P細(xì)胞
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