"HUVEC-C[HUVEC]細胞：人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料：臍靜脈；內(nèi)皮細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
CAL-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
IEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial細胞：-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
COLO680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
PC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
NCI-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
A172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
FDCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
HL-60 clone15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
CHP 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
RC-4B/C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
2PK-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
SK-MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細胞、H1755細胞、PLMVEC細胞
SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細胞、Jeko1細胞、G 401細胞
CAL-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7404細胞、Hep 3B2細胞、GES1細胞
A 172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、EC9706細胞、CX1細胞
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