"Nthy-ori 3-1細(xì)胞：人甲狀腺正常細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：甲狀腺；SV４０轉(zhuǎn)化；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
IAR-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞
L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細(xì)胞、J-111細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
OVCAR-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞
Hs852細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP1細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞
H-2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細(xì)胞、WM-239細(xì)胞、TCC Sup細(xì)胞
Fetal Human Colon細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、SR786細(xì)胞
HLE-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞
NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞
HCC94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細(xì)胞、AN-3細(xì)胞、H2227細(xì)胞
FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞
TE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、Med 341細(xì)胞
TE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞、Med 341細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
Hep G2-Luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細(xì)胞、A673細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
COLO-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞
EBC-1/original細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
COLO201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞
OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞
LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞
HS578細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞
H-3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080細(xì)胞、RL95細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞
H-1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞
TGBC-11-TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞
ESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-79細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞
LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞
P3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
Okayama University Medical School-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EHEB細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞、2008細(xì)胞
hCMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細(xì)胞、EBTr細(xì)胞、MN9D細(xì)胞
GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞
OsA-CL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 231細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞
Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞
MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
R D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞
MDA-MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞
THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞
EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
T-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞、BL-6細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
B-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細(xì)胞、SaOS細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞
TCMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-02細(xì)胞、LM1細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞
Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
FTC133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1395細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞
HOSEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
C8D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞
HPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW780細(xì)胞、KE39細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞
RTMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
Mel RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe 1細(xì)胞、CEF細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
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