"MARC-145細胞：猴胚胎腎上皮細胞系
細胞背景資料：胚腎；自發(fā)永生
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
SNU-387細胞系相關產(chǎn)品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
RCC23細胞系相關產(chǎn)品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
SKNBE(2c)細胞系相關產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
H747細胞系相關產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
Hs-281-T細胞系相關產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
NCI-H920細胞系相關產(chǎn)品：HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
WEHI164細胞系相關產(chǎn)品：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
UCW 100細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
Tb 1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
SW 962細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
NCIH322細胞系相關產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
DMS-114細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
MSTO-211 H細胞系相關產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞
SW480細胞系相關產(chǎn)品：HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
MV4II細胞系相關產(chǎn)品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
MV4II細胞系相關產(chǎn)品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
CL34細胞系相關產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
SW 900細胞系相關產(chǎn)品：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
T47D細胞系相關產(chǎn)品：AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
RBL 1細胞系相關產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
MDAPCa-2b細胞系相關產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
LIXC-002細胞系相關產(chǎn)品：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
HT144mel細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
143TK-細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
HL-60 clone15細胞系相關產(chǎn)品：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
PL-45細胞系相關產(chǎn)品：KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
Melanoma 14細胞系相關產(chǎn)品：T. T細胞、NSC-34細胞、OVCAR5細胞
A549 ATCC細胞系相關產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
NCIH1755細胞系相關產(chǎn)品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
LCD細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
SUM102細胞系相關產(chǎn)品：CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞
CAL62細胞系相關產(chǎn)品：H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
C-4I細胞系相關產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
H774細胞系相關產(chǎn)品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
Karpas-299細胞系相關產(chǎn)品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
S-16細胞系相關產(chǎn)品：Hs578Bst細胞、Vero 76 clone E-6細胞、QGY 7701細胞
RBL-I細胞系相關產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
NCI-128細胞系相關產(chǎn)品：SL1細胞、SW 48細胞、NCIH1651細胞
NRK clone 49F細胞系相關產(chǎn)品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
Hs839.T細胞系相關產(chǎn)品：SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
HANK細胞系相關產(chǎn)品：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
HT 1080細胞系相關產(chǎn)品：KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞
HFL 1細胞系相關產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
H-1688細胞系相關產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
NCCIT細胞系相關產(chǎn)品：L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
PaCa2細胞系相關產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
HCC0095細胞系相關產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
Hs 888.T細胞系相關產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
OCI-Ly 3細胞系相關產(chǎn)品：32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞
AN3CA細胞系相關產(chǎn)品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
PaTu8988s細胞系相關產(chǎn)品：Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
Hs 729細胞系相關產(chǎn)品：SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關產(chǎn)品：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
U87 MG細胞系相關產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細胞、Chinese Hamster Lung細胞、NCI-H929細胞
H-1930細胞系相關產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
CCRF-CEM C7細胞系相關產(chǎn)品：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
Hs 832(C).T細胞系相關產(chǎn)品：H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
NCI-H520細胞系相關產(chǎn)品：Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
ARO細胞系相關產(chǎn)品：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
KYSE 30細胞系相關產(chǎn)品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
TE-5細胞系相關產(chǎn)品：Leydig細胞、KU1919細胞、T.T細胞
H2110細胞系相關產(chǎn)品：COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
UM-UC-3細胞系相關產(chǎn)品：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
OACP4C細胞系相關產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
NH6細胞系相關產(chǎn)品：MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞
TE6細胞系相關產(chǎn)品：MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
C-4 I細胞系相關產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞
Nakata-1細胞系相關產(chǎn)品：H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
HMC3細胞系相關產(chǎn)品：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
SW 1783細胞系相關產(chǎn)品：BEL7404細胞、SMA-560細胞、SU 86.86細胞
PC3M細胞系相關產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、CL-11細胞、BTI-TN5B1-4細胞
RCC23細胞系相關產(chǎn)品：L 929細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、SUPB-15細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關產(chǎn)品：Mel-RM細胞、NCI-H676細胞、SHZ-88細胞
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