"IPEC-J2細(xì)胞：豬小腸上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：小腸；上皮細(xì)胞；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞
A-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-449細(xì)胞、COLO679細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞
OVCAR 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCC1細(xì)胞、HIEC細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞
MDA453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細(xì)胞、CEM clone 7細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞
HECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 19Lu細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞
MN 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細(xì)胞、639-V細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
A20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE2細(xì)胞、HME1細(xì)胞、95C細(xì)胞
NCI-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞、102PT細(xì)胞
KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞
BNCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 2細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞、A72細(xì)胞
DI TNC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MXI細(xì)胞、KP-4細(xì)胞、SW948細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
COLO-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞
HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
RAW 264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2172細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞
H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞、GB-1細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
WC00059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞
M-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
HuT 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞
NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞
TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞
H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞
H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
Okayama University Medical School-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EHEB細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞、2008細(xì)胞
UWB1-289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP細(xì)胞、HHFK細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞
NCM-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細(xì)胞、H-220細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞
H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞、GB-1細(xì)胞
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
CBRH-7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-S細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞、BT20細(xì)胞
MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞
D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞
130T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞、F81細(xì)胞
Capan 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV3細(xì)胞、BHP 10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
CHG-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1573細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-7702細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞
BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞
TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、H711細(xì)胞
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