"P3X63Ag8細(xì)胞：小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒(méi)用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒(méi)了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過(guò)程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
CAL 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞
U-251_MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞、A673細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
End1/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E6細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、H1869細(xì)胞
UMR106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞
RMG-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMCB細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞、293T/17細(xì)胞
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞
J.E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 33細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
Glioma 261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞
Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞
OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞
H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
NCIH524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞、Kit225細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞
TE-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞、H2291細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
SRS-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC-1細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
KP-N-YN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、COV504細(xì)胞
H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞
SUIT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞
OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞
SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞
BE(2)M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞
H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
H-1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
PECAPJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT細(xì)胞、C518細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細(xì)胞、COV362細(xì)胞、SNU216細(xì)胞
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
HO-1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGLH7細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞
NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞
639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞
NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、HT-22細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1975細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283-MED細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞
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