"P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 3T6細胞系相關產(chǎn)品:L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞 H661細胞系相關產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞 OK-WT細胞系相關產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 細胞生長:貼壁 P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 C-33-A細胞系相關產(chǎn)品:PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞 YES2細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞 RIN-m細胞系相關產(chǎn)品:MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞 H716細胞系相關產(chǎn)品:Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞 Clone 929細胞系相關產(chǎn)品:Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 HNSC細胞系相關產(chǎn)品:HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞 Hs 636.T細胞系相關產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞 HCC202細胞系相關產(chǎn)品:NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞 SK-MEL-3細胞系相關產(chǎn)品:HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞 Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品:JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞 H747細胞系相關產(chǎn)品:SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞 3T3細胞系相關產(chǎn)品:Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞 H889細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞 HConEpic細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞 OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞 P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 MDA-415細胞系相關產(chǎn)品:HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞 CEK細胞系相關產(chǎn)品:BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞 ACHN細胞系相關產(chǎn)品:HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞 UM-UC-1細胞系相關產(chǎn)品:FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞 PA1細胞系相關產(chǎn)品:Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞 EB-1細胞系相關產(chǎn)品:SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞 ETCC-007細胞系相關產(chǎn)品:HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞 USMC細胞系相關產(chǎn)品:UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞 P3X63Ag8653細胞系相關產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞 KYSE 140細胞系相關產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞 K-562細胞系相關產(chǎn)品:GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞 HCC-2935細胞系相關產(chǎn)品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞 NCI H69細胞系相關產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞 C-32細胞系相關產(chǎn)品:EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞 MUTZ1細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞 H1373細胞系相關產(chǎn)品:Opossum Kidney細胞、SUP-T1細胞、JEKO細胞 SW 954細胞系相關產(chǎn)品:A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞 SKNBE2C細胞系相關產(chǎn)品:C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞 Ls-174-T細胞系相關產(chǎn)品:H87細胞、MC-CAR細胞、RMS13細胞 MOLT3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞 K562細胞系相關產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞 A72細胞系相關產(chǎn)品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞 HMO6細胞系相關產(chǎn)品:NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞 HCFB(HCF)細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞 MV4:11細胞系相關產(chǎn)品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞 ZR-75-30細胞系相關產(chǎn)品:EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞 HOP-62細胞系相關產(chǎn)品:LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞 L-02細胞系相關產(chǎn)品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞 U 138 MG細胞系相關產(chǎn)品:A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞 H-2073細胞系相關產(chǎn)品:Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞 3T3-442A細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞 KATO 3細胞系相關產(chǎn)品:WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞 HCC-1187細胞系相關產(chǎn)品:High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞 PA12細胞系相關產(chǎn)品:R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞 SKNO1細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞 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c18細胞、NS1-Ag4/1細胞 HCE細胞系相關產(chǎn)品:HEC-1-A細胞、MC-3T3-E1細胞、TE-6細胞 HCC-1569細胞系相關產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、KYSE 410細胞、Hs683細胞 HCC1954細胞系相關產(chǎn)品:MFE280細胞、P116細胞、L132細胞 "
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