"LLC-MK2細(xì)胞：恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護(hù)工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機(jī)，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細(xì)胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NRK-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL 28細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞
SF-767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞
Ramos細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
M059K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMCG1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞、M07e細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
HCC0070細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1395細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞
U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞
GM05862細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
U266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4-11細(xì)胞、H1993細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞
COLO 320 DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197.T細(xì)胞、WPMY1細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
UMNSAH-DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
Hs 746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：APRE-19細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞
U-343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞、786-0細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞
M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
Daoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB-17細(xì)胞、UMRC-2細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
BV2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
HUCCT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞、RCC 786-O細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
P31 FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB453細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞
NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞
HCC1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞、H-3255細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
SUIT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、EHEB細(xì)胞
H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
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