"LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚胎；腎；自發(fā)永生
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細(xì)胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
NCI H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
SW954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、HCC15細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
1.1B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞
BC-025細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞
LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細(xì)胞系
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
HSAS4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細(xì)胞、C8166細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞
NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
MDAMB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細(xì)胞、BC-023細(xì)胞、IM9細(xì)胞
MBT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
UCLA NPA-87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞、HCC78細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
Oregon J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞、ARIP細(xì)胞
NMC-G1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、SNGM細(xì)胞
Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞
NOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
RBL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞
RS(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
LLC-MK2 epithelioid cells恒河猴腎細(xì)胞系
PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞
U-118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH82細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
SW954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS81細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞
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