"HT-3細(xì)胞：人子宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會事。
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細(xì)胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
MES23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞
alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
HuT78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
HT 1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL 6細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞、IALM細(xì)胞
H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
SKOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 1386細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
NCIH2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1.0細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞、LA 4細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞
KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞
KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
NCIH2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH-4細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞
FCCH1024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞
MARC145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRH-0201細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
L428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、H82細(xì)胞
SN12C-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
H184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：28SC細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞
COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞
RL-95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES-1細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞
Ra #1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-10細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞、H-1781細(xì)胞
HCV29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
SW 1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞、MDA231細(xì)胞
293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞
KATOIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細(xì)胞、Z310細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
P3-X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 2185細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞、H460細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
SNU761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細(xì)胞、H1755細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞
Human podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y1細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞
NK-92.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
HcaF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細(xì)胞、YD-15細(xì)胞、RT-112細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞
RIN-14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Uhth-74細(xì)胞、TE11細(xì)胞、TE10細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
HuH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細(xì)胞、LS 513細(xì)胞、PTK-2細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞
GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞
BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE19細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
GTL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1184細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、HT-144細(xì)胞
H-1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細(xì)胞、H283細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞
149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞、NR8383細(xì)胞
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