"KMB-17細胞：人二倍體細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
H498細胞系相關產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
SF295細胞系相關產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
3T3-J2細胞系相關產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
T98G細胞系相關產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
MDA-231細胞系相關產(chǎn)品：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
G519細胞系相關產(chǎn)品：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
JHH7細胞系相關產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
NCIH1563細胞系相關產(chǎn)品：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
kms 11細胞系相關產(chǎn)品：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
UCLA NPA871細胞系相關產(chǎn)品：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
COLO684細胞系相關產(chǎn)品：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
SK-MES細胞系相關產(chǎn)品：624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
KS-SLK細胞系相關產(chǎn)品：SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
BSC1細胞系相關產(chǎn)品：Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞
SW 982細胞系相關產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
SW 982細胞系相關產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
RPMI 7951細胞系相關產(chǎn)品：X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
CV-1.K細胞系相關產(chǎn)品：OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
NCIH211細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞
CHO K1細胞系相關產(chǎn)品：CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞
NRK-49F細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
KLM1細胞系相關產(chǎn)品：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
NCIH661細胞系相關產(chǎn)品：YTMLC-90細胞、H1618細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關產(chǎn)品：OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
WIL2-S細胞系相關產(chǎn)品：COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
GM02131細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
BSC-1細胞系相關產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
NCIH647細胞系相關產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
H2107細胞系相關產(chǎn)品：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
VMRC-RCZ細胞系相關產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
Human Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
H1048細胞系相關產(chǎn)品：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
PaCa2細胞系相關產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
NKM-1細胞系相關產(chǎn)品：ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞
Mono Mac 6細胞系相關產(chǎn)品：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
MB-49細胞系相關產(chǎn)品：HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
PM6細胞系相關產(chǎn)品：H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞
KYSE410細胞系相關產(chǎn)品：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
IAR-20細胞系相關產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
NRK 49F細胞系相關產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
A2058細胞系相關產(chǎn)品：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
MC26細胞系相關產(chǎn)品：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
HRVEC細胞系相關產(chǎn)品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
TCC Sup細胞系相關產(chǎn)品：Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
KALS1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH209細胞、2BS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
Hs 695.T細胞系相關產(chǎn)品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
NHRF細胞系相關產(chǎn)品：D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
SNU407細胞系相關產(chǎn)品：NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
GDM-1細胞系相關產(chǎn)品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
MCM細胞系相關產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關產(chǎn)品：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
HCC94細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
H-735細胞系相關產(chǎn)品：P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
SUM 52細胞系相關產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
P3HRI細胞系相關產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
HOP-62細胞系相關產(chǎn)品：LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞
GBCSD細胞系相關產(chǎn)品：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
VMRCRCZ細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
HCCLM3細胞系相關產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
COLO-320細胞系相關產(chǎn)品：AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
MESSA細胞系相關產(chǎn)品：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
Colo699細胞系相關產(chǎn)品：H-2330細胞、HBZY 1細胞、B16F0細胞
MCF 7細胞系相關產(chǎn)品：293-GP細胞、PK13細胞、TE353.SK細胞
3T3-J2細胞系相關產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、SKLU-1細胞、MALME.3M細胞
VeroC1008細胞系相關產(chǎn)品：BLO 11細胞、1.1B4細胞、M-07e細胞
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