抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-APOA4
中文名稱 載脂蛋白A4抗體
別 名 Apo AIV; APOA 4; Apolipoprotein A IV; MGC142154; MGC142156.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 44kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APOA4
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是載脂蛋白A4抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
鏈霉菌 Streptomycessp.
灰色鏈球菌 Streptomycesgriseus
親和素鏈霉菌 Streptomycesavidinii
帶小棒鏈霉菌 Streptomycesclavuligerus
多刺鏈霉菌 Streptomycesechinatus
羊毛鏈霉菌 Streptomyceslanatus
馬杜拉放線菌 Actinomadura madurae
乙型溶血性鏈球菌 Streptococcus hemolytis-β
綠膿假單胞菌(銅綠假單胞菌) Pseudomonas aeruginosa
乙型副傷寒沙門氏菌 Salmonella paratyphi B
250克
大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基配套平皿9㎝/塊O157 Chromogenic Medium Dish
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配套平皿9㎝/塊Listera Chromogenic Medium Dish
金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基1升Staphylococcus Chromogenic Medium用于金黃色葡萄球菌的顯色培養(yǎng)
霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基配套平皿9㎝/塊Mould And Yeast Chromogenic Medium Dish
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基1升Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng),坂崎桿菌顯藍色,其他腸桿菌顯無色
250克
沙門氏菌顯色培養(yǎng)基配套平皿9㎝/塊Salmonella Chromogenic Medium Dish
250克
金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基配套平皿9㎝/塊Staphylococcus Chromogenic Medium Dish
250克
維生素B12測定用培養(yǎng)基250克Vitamin B12 Assay Broth嬰兒食品和乳粉中維生素B12測定
磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體Glycoborinine中文名:別名:分子式:C18H17NO2
磷酸化腫瘤血管內(nèi)皮標志物8抗體Galantamine hydrobromide中文名:氫溴酸加蘭他敏別名:分子式:C17H22BrNO3
磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體Gramine中文名:蘆竹堿別名:禾草堿分子式:C11H14N2
磷酸化蛋白激酶AKT3抗體Fumitremorgin B中文名:別名:分子式:C27H33N3O5
磷酸化腎上腺素能受體β2抗體N-Benzyllinolenamide中文名:別名:分子式:C25H37NO
載脂蛋白A4抗體 Neurospora│intermedia種屬:Neurospora│intermedia
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:飼料生產(chǎn)菌。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0085
生長條件:28-30℃
存儲條件:定期移植法;其他間型脈孢菌