抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ALDH1
中文名稱 乙醛脫氫酶1型抗體
別 名 cytosolic; Acetaldehyde dehydrogenase 1; AHD2; Ahd-2; AL1A1_HUMAN; ALDC; Aldehyde dehydrogenase 1 family member A1; Aldehyde dehydrogenase 1 soluble; Aldehyde dehydrogenase 1A1; Aldehyde Dehydrogenase; Aldehyde dehydrogenase cytosolic; Aldehyde dehydrogenase family 1 member A1; Aldehyde dehydrogenase liver cytosolic; ALDH 1; ALDH 1A1; ALDH class 1; ALDH-E1; ALDH1 A1; ALDH1; ALDH11; ALDH1A1; ALHDII; MGC2318; PUMB1; RALDH 1; RalDH1; Retinal dehydrogenase 1; ALDEHYDE DEHYDROGENASE A1; Aldehyde Dehydrogenase Family 1, Subfamily A1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 干細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 54kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ALDH1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是乙醛脫氫酶1型抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
那波鏈霉菌 Streptomyces narbonensis
高溫單孢菌 Thermomonspora sp.
灰肉鏈霉菌 Streptomyces griseocarneus
直桿糖多孢菌 Saccharopolyspora rectivirgula
檸檬原小單孢菌 Promicromonospora citrea
毒三素鏈霉菌 Streptomyces toxytricini
呂宋馬杜拉放線菌 Actinomadura luzonensis
殺結(jié)核鏈霉菌 Streptomyces tubercidicus
友好戈登氏菌 Gordonia amicalis
玫瑰小雙孢菌玫瑰亞種 Microbispora rosea subsp. rosea
甘培養(yǎng)基250克Glycine Medium彎曲桿菌甘耐受性試驗(yàn)
快速試驗(yàn)瓊250克H2S Test Medium彎曲桿菌的試驗(yàn)
彎曲桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)250克CCDA Base彎曲桿菌的分離培養(yǎng)
Campy-Cefex瓊基礎(chǔ)250克Campy-Cefex Agar Base用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)
LB-Top Agar250克LB-Top Agar大腸桿菌增殖
LB營養(yǎng)瓊250克LB Nutrient Agar用于發(fā)酵工程、基因工程和分子生物學(xué)中大腸桿菌的培養(yǎng)
脫氧核糖核酶基綠瓊基礎(chǔ)100克Dnase Agar Base With Methyl Green用于細(xì)菌的DNA酶水解試驗(yàn)
波爾頓肉湯250克Bolton Selective Enrichment Broth彎曲桿菌的選擇性增菌培養(yǎng)
LB肉湯250克LB Broth用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)
LB瓊250克LB Agar大腸桿菌增殖
LB Lennox肉湯250克LB Lennox Broth大腸桿菌增殖
LB Lennox瓊250克LB Lennox AgarBR
Rho GTP酶激活蛋白15抗體6-Formyl-1,2,9,10-tetramethoxy-6a,7-dehydroaporphine中文名:別名:分子式:C21H21NO5
抑癌基因結(jié)合蛋白ARID1B抗體Thalidezine中文名:別名:分子式:C38H42N2O7
E3連接酶蛋白ARIH2抗體Uncarine A中文名:鉤藤堿 A別名:Isoformosanine分子式:C21H24N2O4
ADP核糖基化樣因子1抗體Thalifoline中文名:別名:分子式:C11H13NO3
ADP核糖基化因子樣蛋白4抗體Thalrugosidine中文名:別名:分子式:C38H42N2O7
乙醛脫氫酶1型抗體 Acinetobactervenetianus種屬:Acinetobactervenetianus
分離基物:海灘上焦油
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長條件:30℃威尼斯不動桿菌