抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動(dòng)態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測(cè)定血清中某一物質(zhì)的含量時(shí),化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測(cè)定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
乙醛脫氫酶5抗體 別 名 Aldehyde dehydrogenase 5; Acetaldehyde dehydrogenase 5; Aldehyde dehydrogenase 1B1; Aldehyde dehydrogenase family 1 member B1; Aldehyde dehydrogenase X mitochondrial; ALDH class 2; ALDH1B1; ALDH5; ALDHX; MGC2230; Mitochondrial aldehyde dehydrogenase X; OTTHUMP00000021399.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ALDH1B1
中文名稱 乙醛脫氫酶5抗體
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 57kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ALDH1B1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時(shí)易受電解質(zhì)影響,如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會(huì)使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
貝形側(cè)耳 Pleurotus porrigens
蛋絲膜菌 Cortinellus sp.
美味牛肝菌 Boletus edulis
干巴菌 Thelephora ganbajun
黑管孔菌 Bjerkandera adusta
樺密褐孔菌 Fuscoporia obliqua
泡蓋綿皮孔菌 Spongipellis spumeus
冬生多孔菌 Polyporus brumalis
櫟迷孔菌 Daedalea qnercina
一色齒毛菌 Cerrena unicolor
改良MRS瓊培養(yǎng)基250克MRS Lactotacillus Agar Modified乳菌的測(cè)定,雙歧桿菌和嗜乳菌的計(jì)數(shù)
UBA培養(yǎng)基250克UBA Medium啤酒中厭氧菌檢測(cè)
乳菌選擇性瓊250克LBS Agar用于乳桿菌的檢測(cè)
多功能吐溫瓊250克APT Agar乳菌分離培養(yǎng)
7.5%肉湯250克7.5% Sodium Chloride Broth金黃色葡萄球菌選擇性增菌
貝爾德-帕克瓊基礎(chǔ)250克Baird Parker Agar Base用于金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
NBB瓊250克NBB Agar啤酒中厭氧菌檢測(cè)
乳菌選擇性培養(yǎng)基250克Raka-Ray Medium啤酒中乳菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)
PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)250克PYG Broth Base雙岐桿菌增菌培養(yǎng)
皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)250克Cooked Meat Medium Base用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
肉浸液肉湯250克Meat Infusion Broth溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)
MUGal肉湯20克MUGal Broth用于多管發(fā)酵法快速檢測(cè)大腸菌群
載脂蛋白C1抗體N-Acetyldelectine中文名:別名:14-Deacetylajadine; 14-Demethylajacine分子式:C33H46N2O9
載脂蛋白C2抗體Leonurine中文名:益母草堿別名:分子式:C14H21N3O5
載脂蛋白L1抗體Isopteropodine中文名:鉤藤堿E別名:Uncarine E分子式:C21H24N2O4
載脂蛋白L4抗體Dictysine中文名:別名:分子式:C21H33NO3
載脂蛋白L5抗體Murrayanine中文名:別名:分子式:C14H11NO2
乙醛脫氫酶5抗體 Pleurotus eryugii (DC.:Fr.) Quel.種屬:Pleurotus eryugii (DC.:Fr.) Quel.
提供形式:試管斜面
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件:25-28℃,好氧杏鮑菇(斜面)