"SK-MEL-2細胞：人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
PCI-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
H-1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
KU-812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E304細胞、LAN-6細胞、BpRc1細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
COLO206F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞
HHFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
TOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
ECC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
IOSE80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
SNU484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
OKT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
HMrSV5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
VeroC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
HL-60 clone15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
MRC-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞
Panc_05_04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
HUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
OLN-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
SR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、hTERT-HPNE細胞、RIN Cl-5F細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細胞、Tu-212細胞、H820細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、LNCaP細胞
HPDE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細胞、CA922細胞、CPA 47細胞
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