"SK-MEL-2 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SK-MEL-2 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
OCI-AML5細胞系相關產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
OLN93細胞系相關產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
HCT/FU細胞系相關產(chǎn)品：Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞
細胞傳代方法：１：３-１：６傳代，２-３天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HOP 92細胞系相關產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
OVCAR-3細胞系相關產(chǎn)品：TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
SKMEL-2細胞系相關產(chǎn)品：M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞
細胞生長特性：貼壁生長
SK-MEL-2 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：多邊形的
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
KNS42細胞系相關產(chǎn)品：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
MB468細胞系相關產(chǎn)品：Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
SHIN-3細胞系相關產(chǎn)品：Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞
Scott and White No. 13細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
H2081細胞系相關產(chǎn)品：hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
HECV細胞系相關產(chǎn)品：CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
HCC1008細胞系相關產(chǎn)品：HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞
Caki-1細胞系相關產(chǎn)品：NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞
NCIH1385細胞系相關產(chǎn)品：P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
L cells細胞系相關產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
COLO 699細胞系相關產(chǎn)品：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞
CL 1-0細胞系相關產(chǎn)品：HFT-8810細胞、U373-MG細胞、NCI-H292細胞
SK-MEL-2 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
H-2029細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關產(chǎn)品：COLO-320細胞、GM0637細胞、CNE1-LUC細胞
NCIH2085細胞系相關產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
NCIH2085細胞系相關產(chǎn)品：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞
H1573細胞系相關產(chǎn)品：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
REC 1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
COS-1細胞系相關產(chǎn)品：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
HEL細胞系相關產(chǎn)品：OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
Hs729T細胞系相關產(chǎn)品：NIHOVCAR3細胞、EJ細胞、MDA361細胞
SNU761細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
C8166細胞系相關產(chǎn)品：T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
GTL 16細胞系相關產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
Lu99A細胞系相關產(chǎn)品：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞
KM12 SM細胞系相關產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
P 815細胞系相關產(chǎn)品：SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
HCC1954BL細胞系相關產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
MOLT-4細胞系相關產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
ST2細胞系相關產(chǎn)品：R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
NCI-H2405細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
LTEP-s細胞系相關產(chǎn)品：IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞
PK(15)細胞系相關產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
H-2066細胞系相關產(chǎn)品：OVCA433_Bast細胞、RKO-AS-45-1細胞、Panc 02細胞
WM 266-4細胞系相關產(chǎn)品：CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞
H596細胞系相關產(chǎn)品：GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
HeLa S 3細胞系相關產(chǎn)品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
OCI-LY-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
KALS-1細胞系相關產(chǎn)品：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
MOLM-16細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
NCIH2122細胞系相關產(chǎn)品：LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
LO2細胞系相關產(chǎn)品：IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
Malme-3M細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
UWB1-289細胞系相關產(chǎn)品：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
H1793細胞系相關產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
BPH1細胞系相關產(chǎn)品：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
MC57細胞系相關產(chǎn)品：NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
H508細胞系相關產(chǎn)品：ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
SKBr3細胞系相關產(chǎn)品：Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
NCI-H1355細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
C33細胞系相關產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
SK-MEL-2 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
DI TNC1細胞系相關產(chǎn)品：H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞
HMrSV5細胞系相關產(chǎn)品：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
TKB-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
SMA-560細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
TH1細胞系相關產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
AR4-IP細胞系相關產(chǎn)品：S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
C-4-I細胞系相關產(chǎn)品：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
L cells細胞系相關產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
EJ-1細胞系相關產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
HPBALL細胞系相關產(chǎn)品：HBL100細胞、H-2342細胞、KNS62細胞
HL-1細胞系相關產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細胞、A2780-CP細胞、NCI-H69細胞
SHIN-3細胞系相關產(chǎn)品：Ball 1細胞、FRO細胞、HEL 299細胞
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