"SKM-1細胞：人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代；
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO 175.T細胞、H23細胞、SN12-PM6細胞
SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
BT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-90細胞、MDAMB361細胞、PANC-04-03細胞
HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞
HEL9217細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
KMM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
32D.cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
KYSE-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞
MCF7/WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
Namalva細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
FK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
CMT 167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞
751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
LM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
Rat1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
PANC403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞
Y3.AG.1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
HMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
U373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細胞、BIC1細胞、Y-79細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
MDCKII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞
Y3.AG.1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
BT-325細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU601細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NCI-H87細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、TU 686細胞、SW-1222細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL6細胞、BCAP37細胞、HOS-143B細胞
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TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細胞、HCC2108細胞、H526細胞
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