"JHH-7細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。

HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞

HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞

H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞

SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞

Human Lung Microvascular Endothelial細(xì)胞：-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細(xì)胞、S.B.細(xì)胞、Ca761細(xì)胞

BRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞

HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞

Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞

CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞

K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞

Hs852細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP1細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞

Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞、MLFC細(xì)胞

RAW264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細(xì)胞、U-266細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞

M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞

NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞

HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞

SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞

H-2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細(xì)胞、GTL16細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞

GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、H865細(xì)胞

HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞

Kit-225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細(xì)胞、ST486細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞

SKOV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 3細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞、G-292細(xì)胞

HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞

RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞

SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞

HEK.EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2196細(xì)胞、WM115F細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞

CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞

D-341 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞

Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞

PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞

SK RC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞

NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞

FT-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞

NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞

LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞

SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞

LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞

32D.cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞

FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞

OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞

PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞

SUDHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞、SKml2細(xì)胞

MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞

HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞

143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞

SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞

PL45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞

PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞

H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞

RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞

H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞

Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞

McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞

PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞

rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞

OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞

MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞

MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞

High Five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細(xì)胞、SW-48細(xì)胞、D-341細(xì)胞

J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞

JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞

R2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、SW-620細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞

MC57G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞

VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞

Mc Ardle 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-PRF-5細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞

FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞

H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞

CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細(xì)胞、A2008細(xì)胞、BeWo細(xì)胞

PTK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞

WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、H23細(xì)胞

L 540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、BaF3細(xì)胞

H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、T-84細(xì)胞

2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞

"