"C2BBe1細胞：人結腸癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６—１：１０傳代，每周換液２次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
WM115-mel細胞系相關產(chǎn)品：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
Calf Pulmonary Artery 47細胞系相關產(chǎn)品：SKRC-20細胞、MKN-74細胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞
HOS (TE85)細胞系相關產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
HKBML細胞系相關產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
A3細胞系相關產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
GM 2132細胞系相關產(chǎn)品：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
OPM-2細胞系相關產(chǎn)品：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
ATC241細胞系相關產(chǎn)品：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
MDA-MB-468細胞系相關產(chǎn)品：V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
H211細胞系相關產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
COLO 206細胞系相關產(chǎn)品：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
OVCAR 432細胞系相關產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
NRK細胞系相關產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
SW48細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
F442-A細胞系相關產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
F442-A細胞系相關產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
GA10細胞系相關產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
PNT1-a細胞系相關產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
MSTO-211細胞系相關產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
YES 2細胞系相關產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
MDA MB 134VI細胞系相關產(chǎn)品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
HuCC-T1細胞系相關產(chǎn)品：HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
3T3-J2細胞系相關產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
CAOV4細胞系相關產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
HS-5細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
CORL26細胞系相關產(chǎn)品：WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
VM Cub 1細胞系相關產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
H1954細胞系相關產(chǎn)品：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
NUGC-2細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
NuTu-19細胞系相關產(chǎn)品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關產(chǎn)品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
H295R-S1細胞系相關產(chǎn)品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
J 111細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
GC-1 spg細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
WM-115細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
NTC-200細胞系相關產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
Hs688(A)T細胞系相關產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
SCL-2細胞系相關產(chǎn)品：BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
SP-2細胞系相關產(chǎn)品：FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
MDA435細胞系相關產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
MAVER-1細胞系相關產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
MPC 11細胞系相關產(chǎn)品：KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞
H-510A細胞系相關產(chǎn)品：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
WB F344細胞系相關產(chǎn)品：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
NCIH1650細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
NOMO-1細胞系相關產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
NCI-H2347細胞系相關產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
MC-116細胞系相關產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
VeroE6細胞系相關產(chǎn)品：HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
H-EMC-SS細胞系相關產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
HuP-T3細胞系相關產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
CLONE M3細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
LAC細胞系相關產(chǎn)品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
EB-1細胞系相關產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
R3/1細胞系相關產(chǎn)品：JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞
OS-732細胞系相關產(chǎn)品：6T-CEM細胞、H-EMC-SS細胞、M-1細胞
NCIH2023細胞系相關產(chǎn)品：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
G361細胞系相關產(chǎn)品：EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
CAL39細胞系相關產(chǎn)品：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞
COLO 699細胞系相關產(chǎn)品：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
KU-812-F細胞系相關產(chǎn)品：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
EFO27細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2171細胞、SNU601細胞、Human Liver-7702細胞
EU-3細胞系相關產(chǎn)品：PANC0203細胞、H-358細胞、MM96L細胞
Hopkins-92細胞系相關產(chǎn)品：SKBr3細胞、PC.3細胞、LTPA細胞
IPI-2I細胞系相關產(chǎn)品：CAOV3細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、OCI-AML2細胞
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