"SNU-C1細胞:人結(jié)腸癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:每3-5天換液。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 細胞生長特性:懸浮生長 【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞),37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài),所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結(jié)果。1)孵箱應定期用三氧機消毒或者紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水;2)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素;3)超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染;4)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的噴灑中和,約幾小時即可進入操作。 預防細胞污染的注意事項:實驗進行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風扇運轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細胞;即使不同細胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應1-2個月對培養(yǎng)箱定期進行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預濾網(wǎng)。 細胞凍存知識普及:細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1到-2℃/min,當溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。 RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞 HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞 CCRF-SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞 H-810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞 KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞 BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞 H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞 SUDHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞 VMM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞 SHG44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞 HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞 CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞 M-O7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞 10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞 NCIH1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞 WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞 HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞 RPMI no 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞 COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞 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