"DoTc2 4510細(xì)胞:人子宮頸癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2—1:3傳代,每周換液2—3次 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題,究竟是什么原因?qū)е?,我們該怎么進(jìn)行解決?以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過程中細(xì)胞裂解,推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細(xì)胞/毫升;2)解凍過程中的問題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng);3)對冷凍液過敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期;4)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長,存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。 懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的,電擊對細(xì)胞有一定的損傷,選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低,懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。 實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)簡介:干粉培養(yǎng)基:以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調(diào)pH值,過濾,過程中可能會(huì)產(chǎn)生一些濃度誤差,而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想,所以培養(yǎng)的效果會(huì)有差異。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會(huì)減少,因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的,批間差會(huì)很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會(huì)貴很多,以前是這樣,但現(xiàn)在大家都認(rèn)同了;無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顧名思義,就是在細(xì)胞培養(yǎng)中不需要添加血清,但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長因子或細(xì)胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細(xì)胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的,從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當(dāng)。處于發(fā)育的不同分化階段的細(xì)胞(例如干細(xì)胞與定向前體細(xì)胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細(xì)胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時(shí),也去除了一些血清蛋白具有的保護(hù)、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外,它的價(jià)格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。 JVM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細(xì)胞、Caco-2 BBe細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞 MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞 B-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-86-86細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞、H1975細(xì)胞 NCI-H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞 LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞 JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞 SK-N-BE(2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞 SU8686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL3A細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞、LuCL4細(xì)胞 WERI-Rb 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2細(xì)胞、RK13細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞 P3/ag細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECCL-1細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞 MGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 115細(xì)胞、Hs675細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞 hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞 H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞 OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞 H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞 32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞 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NK92-MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP 89細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞 Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞 BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞 Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞 H-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細(xì)胞、SNU368細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞 NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞 C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞 CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞 P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞 SK-N-FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞 GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞 NCI-H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E6-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞 MDA-MB-435 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