"SK-N-AS細(xì)胞：人腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：５-１：１０傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細(xì)胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞
Hx147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：343 MG細(xì)胞、BJAB細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial細(xì)胞：-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞
MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A7r5細(xì)胞、H-1355細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞
253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
MonoMac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-3細(xì)胞、95C細(xì)胞、C38細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
HR-8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞
SUDHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞
LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞
G519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H747細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM134細(xì)胞、C166細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞
OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
SK-MEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
HFLS-OA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF-1細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
50.B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21G細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞、SW579細(xì)胞
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞
NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞
HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
OAW 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-I細(xì)胞、ME-180細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞
UACC-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144-mel細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞、H69C細(xì)胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
DMS 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細(xì)胞、Cates-1B細(xì)胞、HN6細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞、H2198細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞
SW 480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
RKO-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RetroPack PT67細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細(xì)胞、KG-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
C3H 10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞
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