"A-431細胞：人皮膚鱗癌細胞系
細胞背景資料：該細胞源自一位患有皮膚鱗狀細胞癌的８５歲女性，是GiardDJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞在免疫抑制小鼠體內(nèi)可成瘤，在瓊脂上培養(yǎng)可形成克隆；是一個超三倍體人細胞株。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
CT26WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
HIT T-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
RPMI-2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
Intestinal Epithelioid細胞： No. 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
COV 504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
LC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
OVCA 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
H-1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
DB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞
H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR 20細胞、C28/I2細胞、Functional Liver Cell-7細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
BT-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞
KHYG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞
COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
WM 451-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
Hs-688A-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞
IMR-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
HuLEC-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
CO115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
DB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
LUDLU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞
FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
RCSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞
SW-480細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H78細胞、MSB-1細胞、BALL-1細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
H-2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
P31FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細胞、TO 175.T細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
Alexander細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細胞、G401細胞、ES2細胞
SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251 MG細胞、LLC-PK1細胞、GDM-1細胞
NCI-H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1184細胞、HEK 293A細胞、SK LU 1細胞
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