"NK-92MI 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞背景資料：NK細胞；淋巴瘤；男性 
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣 
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內水分在凍結前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩吞K細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細胞生長：懸浮 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
NK-92MI 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系，公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù)，為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學研究中最基礎、也是最常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗，在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護，小心培養(yǎng)，心里都是默默承諾：我要護你一世周全！可是可是……無數(shù)次細胞都因污染而離我而去，投入的不只是我們貌美如花的青春，還有那一去不復返的經費！在細胞生物學，生物化學，免疫學，神經生物學，病理學……只要涉及細胞的研究領域，都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中，也就屬支原體最狡猾了，他最善于隱藏自己，因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡，但會改變細胞的新陳代謝，甚至會改變細胞的基因表達譜，我們就這樣被欺騙了無數(shù)次，誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了?？墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經驗中總結出來，當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時：生長速率改變；活性減弱；形態(tài)改變；染色體畸變；轉染效率顯著降低；細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了，也許你的細胞已經被支原體欺凌了！ 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：懸浮 
NK-92MI 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
COR L279細胞系相關產品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞 
MM134細胞系相關產品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞 
Hep 3B2細胞系相關產品：JKT-1細胞、CCD-841-CoN細胞、769-P細胞 
MUTZ-3細胞系相關產品：H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞 
RKO-E6細胞系相關產品：RetroPack PT67細胞、HMEL細胞、SF126細胞 
NCIH345細胞系相關產品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞 
PC3M細胞系相關產品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞 
LIM 1215細胞系相關產品：U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 
DI TNC-1細胞系相關產品：MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞 
SKNSH細胞系相關產品：OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞 
Pa16C細胞系相關產品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞 
Sc-1細胞系相關產品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞 
OC 316細胞系相關產品：SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞 
Tn5B1-4細胞系相關產品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞 
MIA Paca2細胞系相關產品：HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞 
BT483細胞系相關產品：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞 
BT483細胞系相關產品：SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞 
IMR 90細胞系相關產品：SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞 
NSH細胞系相關產品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞 
OVCA5細胞系相關產品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞 
NK-92MI 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
DHL-4細胞系相關產品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞 
MonoMac1細胞系相關產品：HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞 
LAN-5細胞系相關產品：GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞 
CV1細胞系相關產品：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞 
PLA-801C細胞系相關產品：FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞 
TW 01細胞系相關產品：A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞 
751-NA-15細胞系相關產品：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞 
Ly19細胞系相關產品：CRFK細胞、SuperTube細胞、NB9細胞 
MPC-5細胞系相關產品：NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞 
H4-II-E-C3細胞系相關產品：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞 
SKRC-20細胞系相關產品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞 
H524細胞系相關產品：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞 
2E8細胞系相關產品：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞 
DHL-8細胞系相關產品：NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞 
M 1細胞系相關產品：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞 
NOZAWA細胞系相關產品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞 
MES-SA-Dx5細胞系相關產品：CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞 
SUDHL-16細胞系相關產品：F-81細胞、Porcine Kidney-13細胞、NCIH1781細胞 
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關產品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞 
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關產品：P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞 
P3X63Ag8653細胞系相關產品：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞 
MV 3細胞系相關產品：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞 
A-72細胞系相關產品：MDA-157細胞、aTC1 Clone 6細胞、NU-GC-4細胞 
U266BL細胞系相關產品：HP615細胞、RMG1細胞、NOZ細胞 
U2932細胞系相關產品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞 
H735細胞系相關產品：Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞 
BC-019細胞系相關產品：OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞 
RT-BM細胞系相關產品：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞 
3T3(A31)細胞系相關產品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞 
NIH 3T3細胞系相關產品：AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞 
RPMI #8226細胞系相關產品：He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞 
293 H細胞系相關產品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞 
PC9細胞系相關產品：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞 
DU-145細胞系相關產品：HRGEC細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、Hx-147細胞 
PC-9S1細胞系相關產品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞 
HSC/mHSC細胞系相關產品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞 
H-II-E-C3細胞系相關產品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞 
PCI:SG231細胞系相關產品：NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞 
NCI-SNU-475細胞系相關產品：PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞 
Rabbit Kidney 13細胞系相關產品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞 
A549/ATCC細胞系相關產品：DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞 
NK-92MI 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者NK細胞系
Hk-2細胞系相關產品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞 
SKNSH細胞系相關產品：OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞 
RAW264細胞系相關產品：TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞 
KE 37細胞系相關產品：SU-DHL-4細胞、NCI-H747細胞、KP-N-RT細胞 
Molm 13細胞系相關產品：NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞 
BC-025細胞系相關產品：Ramos G6.C10細胞、Human Microglia Clone 3細胞、NCI-H748細胞 
T98G細胞系相關產品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞 
SW-954細胞系相關產品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞 
NCI-H1666細胞系相關產品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞 
Y 1細胞系相關產品：MESSA/Dx5細胞、McCoy B細胞、32D CL3細胞 
SV-HUC細胞系相關產品：AD-293細胞、CAKI 1細胞、CORL51細胞 
Hep 3B2_1-7細胞系相關產品：SMMC 7721細胞、SUM-149細胞、PK-13細胞 
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