NK-92MI(人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞)
1.售前須知:
該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。
2.細胞起源:
細胞簡稱 NK-92MI
細胞別稱 NK-92細胞是從一位患有急進性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周 血單核細胞衍生來的一株IL-2依賴型NK細胞株。NK-92MI細胞是轉(zhuǎn) 染得到的源自NK-92細胞的IL-2非依賴的NK細胞株。親本細胞NK-92 通過微粒體基因轉(zhuǎn)化法用逆轉(zhuǎn)錄病毒MFG-hIL-2載體攜帶的人IL-2cD NA進行轉(zhuǎn)化??赡苡捎谳d體整合到基因組DNA中,轉(zhuǎn)化是穩(wěn)定的。 這株細胞對很多惡性細胞有細胞毒性;鉻釋放試驗顯示它能殺死K56 2細胞和Daudi細胞。NK-92細胞有以下特征:CD2、CD7、CD11a、 CD28、CD45、CD54表面標(biāo)記陽性;CD1、CD3、CD4、CD5、CD8 、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20、CD23、CD34和HLA-DR表 面標(biāo)記陰性。其親本IL-2依賴的細胞株NK-92細胞及另一株同樣來源 于NK-92細胞株的IL-2非依賴的細胞株NK-92CI都可從ATCC得到。N K-92MI細胞和NK-92CI細胞這兩個變種都包含、表達并合成hIL-2cD NA。NK-92MI細胞合成的IL-2水平比NK-92CI高,而親本細胞不合 成表達。1998年9月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體,其后代通 過BM細胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后6周,用Hoechst染 色、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測試進行支原體檢測,結(jié)果都呈陰性。
供體年齡 男性,50歲
組織來源 外周血
細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 淋巴瘤細胞
生長特性 懸浮細胞
生物安全等級 2
3.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 MEMα(PM150422)+0.2mM Inositol+0.1mM βmercaptoethanol(PB180633)+0.02mM Folic Acid+12.5% HS(164215)+12.5% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
液氮
4.傳代方法:
傳代步驟
可通過補充新鮮培養(yǎng)基或者離心換液兩種方式維持培養(yǎng),離心轉(zhuǎn)速參考1200 rpm(250g左右),離心3分鐘
傳代比例(密度) 5×10^5-1×10^6cells/mL
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動物治療等其它臨床診斷使用!以實際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。
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