"RFL-6 大鼠成纖維細胞系
細胞背景資料：胚肺；成纖維細胞；SD大鼠 
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣 
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內蓋好蓋子，打開開關和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
RFL-6 大鼠成纖維細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
RFL-6 大鼠成纖維細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
NUGC-4細胞系相關產品：WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞 
H19-7細胞系相關產品：GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞 
Panc4.03細胞系相關產品：RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞 
b.End3細胞系相關產品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞 
H650細胞系相關產品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞 
Hepatoma-22細胞系相關產品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞 
UCLA SO M14細胞系相關產品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞 
WBF344細胞系相關產品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞 
P3/ag細胞系相關產品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞 
H322細胞系相關產品：P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞 
MGH-UI細胞系相關產品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞 
253JBV細胞系相關產品：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞 
WM-451Lu細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞 
LTEPsm細胞系相關產品：NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞 
D562細胞系相關產品：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞 
GP5d細胞系相關產品：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞 
HS-68細胞系相關產品：HCC-1438細胞、CCD-112 CoN細胞、ChaGo-K-1細胞 
IEC18細胞系相關產品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞 
28SC細胞系相關產品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞 
CCC-HSF-1細胞系相關產品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞 
RFL-6 大鼠成纖維細胞系
SRA 01/04細胞系相關產品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞 
Capan 2細胞系相關產品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞 
NCI-HUT-292細胞系相關產品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞 
H-211細胞系相關產品：SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞 
RPMI No. 1846細胞系相關產品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞 
H820細胞系相關產品：CHP-100細胞、PC 61細胞、IAR-20細胞 
COLO-320HSR細胞系相關產品：UACC-812細胞、G-401細胞、NIH3T3細胞 
OK-WT細胞系相關產品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 
751-NA細胞系相關產品：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞 
QBC-939細胞系相關產品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞 
NCI-322細胞系相關產品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞 
H-1993細胞系相關產品：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞 
HLEB-3細胞系相關產品：MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞 
JIMT1細胞系相關產品：SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞 
MDA-MB436細胞系相關產品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞 
VP 229細胞系相關產品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞 
MB231細胞系相關產品：MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞 
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產品：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞 
IPLB-SF 21細胞系相關產品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞 
H3255_DA細胞系相關產品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞 
Hs27F細胞系相關產品：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞 
SKCO 1細胞系相關產品：TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞 
BJ [Human fibroblast]細胞系相關產品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞 
RT-4細胞系相關產品：CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞 
Rat1細胞系相關產品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞 
SKMEL3細胞系相關產品：H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞 
HRMC細胞系相關產品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞 
H-1876細胞系相關產品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞 
U2-OS細胞系相關產品：bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞 
H-810細胞系相關產品：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞 
TE3A細胞系相關產品：U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞 
HCC2935細胞系相關產品：GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞 
H-1703細胞系相關產品：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞 
Jurkat-FHCRC細胞系相關產品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞 
SL1細胞系相關產品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞 
Vero 76細胞系相關產品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞 
H460細胞系相關產品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞 
LA-N-6細胞系相關產品：NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞 
UCLA SO M21細胞系相關產品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞 
DSL-6A-C1細胞系相關產品：HTh 74細胞、SW-1271細胞、HMEC細胞 
SUDHL-6細胞系相關產品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞 
RFL-6 大鼠成纖維細胞系
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關產品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞 
SNU-C1細胞系相關產品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞 
HCC1359細胞系相關產品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞 
HIT-T15細胞系相關產品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞 
NCIH1184細胞系相關產品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞 
HuT78細胞系相關產品：P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞 
HBVSMC細胞系相關產品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞 
HTh74細胞系相關產品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞 
SUPM2細胞系相關產品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞 
NPC-TW039細胞系相關產品：Madison lung細胞、OsA-CL細胞、NB-9細胞 
HuH1細胞系相關產品：NCI-H747細胞、VAESBJ細胞、JB6Cl30細胞 
Panc4.03細胞系相關產品：RMG-1細胞、OCI/AML-3細胞、C3H 10T1/2細胞 
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