"RFL-6 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚肺；成纖維細(xì)胞；SD大鼠
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
HCT116/L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 1005細(xì)胞、LAC細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞
D324 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞
PA317細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞、H3396細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
RFL-6 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進(jìn)展，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜，需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多，下面就一些動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對于不需要長期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hs742T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞
32Dcl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞
NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL28細(xì)胞、L1210細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RFL-6 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞
Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、WM239細(xì)胞
NUGC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL-2細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞
Leukemic 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細(xì)胞、H-1693細(xì)胞、Co320細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞
RFL-6 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞
RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞
SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞
YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞
Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞
KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細(xì)胞、COV362細(xì)胞、SNU216細(xì)胞
HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞
MDA-MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞
Mono Mac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoN細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
NPA87-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52PE細(xì)胞、Y3細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞
T-47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149 PT細(xì)胞、HT115細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞
BCAP37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSCT6細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞、GM00637細(xì)胞
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
NCI-H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞
DHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞、SBC5細(xì)胞
Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞
NOR 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan1細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞、Hut292細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
MIN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC090細(xì)胞、DCS細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞
TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞
AG06814-J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞
SKMEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone 3細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞、RGC6細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-L細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞
H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
RFL-6 fibroblast cells大鼠成纖維細(xì)胞系
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
IEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、MM1S細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、HONE1細(xì)胞
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1細(xì)胞、293AD細(xì)胞、HMCB細(xì)胞
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