"RLE-6TN Thawing大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
RLE-6TN Thawing大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
細胞生長:貼壁
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數;RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數來表示單位。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
RLE-6TN Thawing大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
細胞生長特性:貼壁
冷凍細胞解凍程序:依據細胞株數據單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內。依據細胞種類和濃度,于無菌操作臺內取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
OKAC1細胞系相關產品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
KNS-81細胞系相關產品:H-1876細胞、RS1細胞、BRL 3A細胞
CNE-2Z細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
HN4細胞系相關產品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
NCI-N87細胞系相關產品:NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
LU-65M細胞系相關產品:OE19細胞、LL/2細胞、NCIH1436細胞
MM1.S細胞系相關產品:TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
GT39細胞系相關產品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關產品:EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關產品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
SW-1417細胞系相關產品:Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
IPEC1細胞系相關產品:SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
NCI-H510A細胞系相關產品:G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞
NR 8383細胞系相關產品:RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞
SHI-1細胞系相關產品:T24(ECV304)細胞、TGW細胞、SK MEL 28細胞
BCAP37細胞系相關產品:HSCT6細胞、HEK 293T/17細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
SUIT 2細胞系相關產品:K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
HL60細胞系相關產品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
MONO-MAC 6細胞系相關產品:H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
HTori-3細胞系相關產品:LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
NCI-H1355細胞系相關產品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
NCI-H1355細胞系相關產品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
AU-Mel細胞系相關產品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
624 MEL細胞系相關產品:SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
NCI H747細胞系相關產品:NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
SK-NEP-1細胞系相關產品:SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞
RLE-6TN Thawing大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
NEC-8細胞系相關產品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
L-6細胞系相關產品:L02細胞、ATN-1細胞、HOS-143B細胞
X63-Ag8.653細胞系相關產品:LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
SW-837細胞系相關產品:P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞
Hs-281-T細胞系相關產品:NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
SW 527細胞系相關產品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
HEP3B2細胞系相關產品:Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
MNNG/HOS細胞系相關產品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
TF-1a細胞系相關產品:Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
DH 82細胞系相關產品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
SCL1細胞系相關產品:NCTC clone 1469細胞、HTR-8細胞、RWPE1細胞
OUMS-23細胞系相關產品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
Namalva細胞系相關產品:Nakata-1細胞、FF-WT-BJ細胞、Tca-83細胞
hTERT-HME1細胞系相關產品:A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞
PL11細胞系相關產品:BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
Hs606T細胞系相關產品:FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
U266-B1細胞系相關產品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
G 401細胞系相關產品:PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關產品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
Fetal Human Colon細胞系相關產品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
SKUT-1細胞系相關產品:H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
P30-OHK細胞系相關產品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
EBC-1細胞系相關產品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
BSC-1細胞系相關產品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
174xCEM.T2細胞系相關產品:NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
NCIH1838細胞系相關產品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
DoTc2 4510細胞系相關產品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
HCCC9810細胞系相關產品:Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞
Hs 578T細胞系相關產品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
CCD 841 CoN細胞系相關產品:SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞
Karpas-422細胞系相關產品:Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
CAL 12T細胞系相關產品:HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
RLE-6TN Thawing大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
Hs 940.T細胞系相關產品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
NCI-747細胞系相關產品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
NCI-747細胞系相關產品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
LC-1/sq細胞系相關產品:Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
SW948細胞系相關產品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
EA.Hy926細胞系相關產品:NCI-H1770細胞、SCCVII細胞、P36細胞
Caki-1細胞系相關產品:NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞
4-1st細胞系相關產品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
293AD細胞系相關產品:AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞
BEP2D細胞系相關產品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
HBEpiC細胞系相關產品:RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
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