"RLE-6TN Cell:大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RLE-6TN Cell:大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
Calu 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細胞、SW780細胞、RT4-D6-P2T細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
細胞生長特性:貼壁
RLE-6TN Cell:大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
C643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
RAW-264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
RLE-6TN Cell:大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
MC3T3-E1(C4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
NBL_S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
NCI-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
A 72細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細胞、SW-579細胞、UPCISCC154細胞
SUM102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞
Y3-Ag1,2,3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞
P3JHR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
ROS17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
Hs840_T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
MC 3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
P3J HR1-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
HuO9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞
HEC1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細胞、MIMVEC細胞、OE-21細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
H4IIE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
G402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞
MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
CATHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細胞、GM 637細胞、GM 637細胞
H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
N9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
HFTF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
RLE-6TN Cell:大鼠肺泡Ⅱ型細胞系
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
8305C_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞
RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
ROS 17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-427細胞、BpRcl細胞、Ly19細胞
H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細胞、HCa/16A3-F細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
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