"MKN45 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞系由S Akiyama建立，源于一位３５歲患有印戒細(xì)胞癌的女性的胃淋巴結(jié)。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
MKN45 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過(guò)程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來(lái)表示單位。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類(lèi)脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MKN45 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁+懸浮
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類(lèi)缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類(lèi)是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)及一些喹諾酮;其他類(lèi)抗生素如基糖苷類(lèi)、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞形態(tài)特性：淋巴母細(xì)胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞
H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
TE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞、DLM8細(xì)胞
COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞
PL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 266細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
KYSE-450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHHCALL2細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞
TMD8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞
HEK293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞、U87MG細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
Mel526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-MS細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
SHZ-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF382細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞
SNU216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞、HeLa細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
MKN45 Thawing人胃癌細(xì)胞系
NCIH146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H64細(xì)胞、A375SM細(xì)胞、293-F細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
CAL62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2405細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞
SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞
MDAPCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞、HS-683細(xì)胞
DMS-273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840_T細(xì)胞、2780細(xì)胞、201T細(xì)胞
MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞
H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞
H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞
JiyoyeP-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
HCV-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞
H-2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI Rb-1細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞
GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞
MDA-MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
MKN45 Thawing人胃癌細(xì)胞系
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
HEI193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
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