"NOZ Thawing人膽囊癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：患者有癌性腹膜炎。細(xì)胞為中等分化的管狀膽囊癌。會分泌AFP和CEA。倍增時間４８小時，板植率１４-１９%。細(xì)胞可在裸鼠中成瘤，形態(tài)與原發(fā)腫瘤相似。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NOZ Thawing人膽囊癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】１)從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護(hù)工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機(jī)，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細(xì)胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NOZ Thawing人膽囊癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測，而且它對細(xì)胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
A875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細(xì)胞、U2932細(xì)胞、H820細(xì)胞
HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞
Hep G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU1細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞
THP 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-226細(xì)胞、C2C12細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
NCI-H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞、Colo16細(xì)胞
DMS153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-9細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞
HCS-2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞
A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-157細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
Kit-225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
6-T CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1.1B4細(xì)胞、TR146細(xì)胞、Walker256細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOK細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞、H1793細(xì)胞
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
LNCaP-C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6細(xì)胞、QGY細(xì)胞、HT29細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
M07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BS-C-1細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
NOZ Thawing人膽囊癌細(xì)胞系
8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCD細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞、293細(xì)胞
QBI-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞
RAW 264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2172細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞
QBI-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G401細(xì)胞、C33-A細(xì)胞、Hs729細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
HT 1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1A細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞
Hs-852-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞
SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
A-204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞
CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞
CHO Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、A375S2細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS513細(xì)胞、293T/17細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞
TE-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細(xì)胞、COV434細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞
Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
KMBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
16HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞
NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞
SKNMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU812-F細(xì)胞、BC-028細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞
NCIH1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞
SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞
OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞
GM04154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-1細(xì)胞、PC9細(xì)胞、CEL細(xì)胞
NOZ Thawing人膽囊癌細(xì)胞系
H-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細(xì)胞、PC3M細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
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