"C8-D1A Thawing鼠小腦細胞系
細胞背景資料:該永生化細胞系源自出生8天小鼠小腦組織,由B Pessac, D Trisler建立。該細胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細胞特征。該細胞為GFAP陽性細胞,除此之外,沒有檢測到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細胞的分子標記。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
C8-D1A Thawing鼠小腦細胞系
細胞生長:貼壁
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C8-D1A Thawing鼠小腦細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
B16-F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細胞、HEK293-A細胞、EU-4細胞
WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
OAW42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
Hs 863.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細胞、A431細胞、WEHI-231細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
HLCL9B10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞
MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細胞、HS 445T細胞、NMC-G1細胞
TE-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leydig細胞、HSC5細胞、THC-8307細胞
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
H-1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞
hADSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細胞、MESSA Dx5細胞、J82COT細胞
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞
WISH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
C8-D1A Thawing鼠小腦細胞系
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
MM1-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細胞、L-M (TK-)細胞、UMRC2細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞
Kit 225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
HepaRG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
L6565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
NCIH1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞
HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
HS-294-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細胞、HOC-1細胞、CMT-64細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
C8-D1A Thawing鼠小腦細胞系
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
NCI H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
NCI-H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
SNU-739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞
H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
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