"C8-D1A Cell:鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:該永生化細(xì)胞系源自出生8天小鼠小腦組織,由B Pessac, D Trisler建立。該細(xì)胞具有小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特征。該細(xì)胞為GFAP陽性細(xì)胞,除此之外,沒有檢測到其它神經(jīng)膠質(zhì)神經(jīng)元或小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的分子標(biāo)記。
HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
TKB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細(xì)胞、GM05862細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
NCI-H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
C8-D1A Cell:鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時,細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA-MB-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細(xì)胞、MRASMC細(xì)胞、SCC090細(xì)胞
ECC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 Swiss Albino細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞、H2126細(xì)胞
R.K.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞
SK-BR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
C8-D1A Cell:鼠小腦細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
SGC7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-H細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞、Co-115細(xì)胞
Panc3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG13細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
B95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32.T細(xì)胞、CoC1細(xì)胞、118MG細(xì)胞
SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU145細(xì)胞、HT 115細(xì)胞、H87細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
C8-D1A Cell:鼠小腦細(xì)胞系
COLO 684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-620細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞
COS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞
VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞
H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞
NCIH378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320-DM細(xì)胞、COS-7細(xì)胞、EC9706細(xì)胞
SK-CO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、CV 1細(xì)胞
Caov-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR983F細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞、SW13細(xì)胞
CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞
Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞
Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞
SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
RGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683.T細(xì)胞、L615細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞
NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞
UMNSAH-DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC10細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
Panc2_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細(xì)胞、D 407細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
NR 8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-30細(xì)胞、SF 539細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞
GH 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞
Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞
SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
Y3.AG.1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
RGC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F0細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、A 72細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
BpRc1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME1細(xì)胞、H1048細(xì)胞、IM-9細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
H82sclc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y 1細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
WEHI-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞
HCT 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞
C8-D1A Cell:鼠小腦細(xì)胞系
H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIO-M1細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞
PLA 802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7ADR細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、MGH-UI細(xì)胞
CTLA4Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-H細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞、A2008細(xì)胞
JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞
SHSY-5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞
PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2a細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、K-562細(xì)胞
KLN205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
SNUC2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞
OCIAML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG10815細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、Dami細(xì)胞
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關(guān)鍵字: C8-D1A Cell:鼠小腦細(xì)胞系
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