"SNU-216 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SNU-216 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟：１.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SNU-216 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
LNCaP.FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞、UACC812細(xì)胞
UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞
AG 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-RA1細(xì)胞、IAR20細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞
HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞、SNK1細(xì)胞
Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH747細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞、NCI747細(xì)胞
C32 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA-DX5細(xì)胞、C1R細(xì)胞、NGEC細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞
Hs-852-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343MG細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
CTV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、GM00637細(xì)胞
LS174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIBEC細(xì)胞、33604細(xì)胞、H1838細(xì)胞
alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞
SUDHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H345細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞、H-676B細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞
LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞
Y 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA/Dx5細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞
SNU-216 Thawing人胃癌細(xì)胞系
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞
A-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
AQ-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149PT細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞
F36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞、373MG細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
LU65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細(xì)胞、H2405細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞
SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
MGECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBR-3細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞
MiaPaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
A-204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞
SKNEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、4175細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞
B16 F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細(xì)胞、H-1703細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
MC57G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞
SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞
SUSM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞
U 138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞
OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、SNGM細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
SNU-216 Thawing人胃癌細(xì)胞系
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞
293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-16細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞、H1693細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
Li-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 929細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞
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