"NCI-H1299 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：這株細(xì)胞來(lái)源于一個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移?；颊呓邮芰顺跗诜暖?。細(xì)胞均一性的部分缺失p５３蛋白，并缺少p５３蛋白表達(dá)。細(xì)胞可以合成０.１pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H1299 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代；３天傳代一次。
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞來(lái)源說明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H1299 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；多角形
UMUC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞
IHC-ST1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be-Wo細(xì)胞、H-3255細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞
190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞
MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞
PC-3/M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞
SU-DH-L5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
KASUMI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：9L細(xì)胞、Tca-8113細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞
Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB-1 Lu細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞
UMUC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCAEC細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞
CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞
WM115F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞
Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞
EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
NCI-H1299 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
SNUC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細(xì)胞、PY8119細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞
MMAc-Serum Free細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細(xì)胞、TE-4細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
CESS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞、CaSki細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
SKG-IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞
B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞
DI TNC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MXI細(xì)胞、KP-4細(xì)胞、SW948細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
Bx-PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832T細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、L78細(xì)胞
624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
HONE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞、H1522細(xì)胞
U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞
KGN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞
NCI H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
OV-1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C127細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞
WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞
BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細(xì)胞、H-676細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞、HuH28細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
NCI-H1299 Thawing人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞
ME16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞
NCIH460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞
SW948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細(xì)胞、Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞
HCASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細(xì)胞、J-774細(xì)胞、MA-104細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
CTLL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞、MC9細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1838細(xì)胞、H157細(xì)胞、SK 1細(xì)胞
MARC 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞
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