"NCI-H1299細胞：人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：這株細胞來源于一個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移?；颊呓邮芰顺跗诜暖煛＜毎恍缘牟糠秩笔５３蛋白，并缺少p５３蛋白表達。細胞可以合成０.１pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代；３天傳代一次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
J-774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
SCC VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
HuTu-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
PANC3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
A427細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
GM06141B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細胞、SN12-PM6細胞、H-719細胞
PL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細胞、JM-Jurkat細胞、SK-N-FI細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
MCF12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
HAC-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
AM38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE­8.1/2細胞、HDMEC細胞
SK-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
GM03573A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
GM00637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
Hepatoma-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細胞、Colo320細胞、B-104細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
NCIH820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
NCI-H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞
BNL CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
H9c2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞
SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
MOLT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
Leghorn Male Hepatoma細胞：細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
RMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
E.L.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
SK-N-BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
BpRc1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
Ketr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
PE/CA-PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
OACP4 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
HS766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細胞、SUDHL-4細胞、BNL.CL2細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細胞、SK_N_BE2C細胞、U-343 MG細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細胞、HEC-1-A細胞、DH 82細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-82細胞、NCIH1623細胞、HSC 3細胞
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