"HEK293-F Thawing人胚腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HEK293-F Thawing人胚腎細胞系
細胞生長：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEK293-F Thawing人胚腎細胞系
細胞生長特性：貼壁生長；懸浮生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
N-Tera-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
KPL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞
B-95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
SU 86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
Sc-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細胞、Z138細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細胞、MC3T3-E細胞、Anip[973]細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
HS766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL(2)細胞、HMO6細胞、PZ-HPV-7細胞
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
U118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
HS578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
HEK293-F Thawing人胚腎細胞系
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
RPMI.8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞
TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞
293/EBNA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
MUTZ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞
KMS-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞
MC-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
L-M(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2/D1細胞、PANC-03-27細胞、DSL-6A-C1細胞
SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞
HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
EC109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra No. 1細胞、Institute for Medical Research-90細胞、COLO678細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
HEK293-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
NCIH2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
AMJ2-C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
A204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞
MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
HEK293-F Thawing人胚腎細胞系
HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
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